作者:牛向兰; 马旭; 张燕荷; 王琳密度梯度离心法孕妇外周血dgc胎儿有核红细胞聚合酶链反应性别决定基因
摘要:目的探讨密度梯度离心法(density gradient centrifugation,DGC)富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞的可行性及其在产前基因诊断中的价值. 方法采用密度梯度离心法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞,以流式细胞分析鉴定富集细胞,同时对富集前后孕妇外周血DNA进行男性性别决定基因(sex-determining region Y,SRY)检测. 结果 5例孕妇外周血单个核细胞靶细胞群糖蛋白A(glycophorinA,GPA)阳性细胞富集前平均含量为0.02 ‰~0.1 ‰,而富集后平均含量高达0.5 %~2.8 %;24例孕10~40周孕妇(包括以上5例)中,孕妇外周血DNA富集前SRY基因男性诊断符合率69.2 %(9/13),诊断总符合率83.3 %(20/24),而富集后分别为84.6 %(11/13),91.6 %(22/24),11例怀女胎的孕妇富集前、后均未检出SRY基因. 结论密度梯度离心法可从孕妇外周血中富集胎儿细胞,且所得细胞已基本满足体外扩增单拷贝基因所需的模板量,该方法可应用于非损伤性产前诊断.
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