作者：蒋时红; 吴耀松; 孙超龙; 贾乐乐益肺逐积方a549细胞凋亡表皮生长因子受体g蛋白偶联受体30
摘要：目的：通过体外实验观察益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性、细胞凋亡以及表皮生长因子受体（EGFR）,G蛋白偶联受体30（GPR30）蛋白表达的影响,探讨中药复方益肺逐积方抑制肺癌细胞活性,诱导肺癌细胞凋亡的作用机制。方法：将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,益肺逐积方高、低质量浓度组分别加入2,1.5 g·L~（-1）益肺逐积方培养液,5-氟尿密啶（5-FU）组加入2.5 g·L~（-1）5-FU培养液,溶剂组加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液,分别作用24,48 h后,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性的影响;吖啶橙/溴乙啶（AO/EB）荧光染色观察益肺逐积方作用不同时间后人肺腺癌A549细胞的凋亡形态学变化;流式细胞术（FCM）测定益肺逐积方作用下人肺腺癌A549细胞的凋亡率;利用倒置显微镜观察益肺逐积方作用24,48 h后A549细胞的形态学改变,蛋白质免疫印迹法（Western blot）测定人肺腺癌A549凋亡细胞EGFR,GPR30蛋白的表达。结果：与溶剂组比较,1.5,2 g·L~（-1）益肺逐积方均能抑制人肺腺癌A549细胞活性（P〈0.05）,诱导A549细胞发生不同程度的凋亡形态学改变;流式细胞术检测显示,益肺逐积方作用24,48 h后,可使人肺腺癌A549细胞其发生晚期凋亡（P〈0.05）;Western blot结果显示,益肺逐积方可以不同程度地下调人肺腺癌A549细胞GPR30,EGFR蛋白的表达（P〈0.05）。结论：益肺逐积方可抑制人肺腺癌A549细胞活性、诱导其发生晚期凋亡,并使其发生凋亡形态学改变,这可能与下调EGFR,GPR30蛋白表达有关。
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