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Oct4对鼠-猪异种核移植胚胎早期发育的影响

作者:阎新龙; 林艳丽; 周艳荣; 温叶飞; 叶华虎...体细胞核移植nih3t3胚胎发育

摘要:目的探讨Oct4转录因子能否促进鼠-猪异种核移植胚胎的早期发育。方法RT—PCR获得小鼠Oct4基因,构建pEGFP—N1—Oct4-EGFP融合质粒及pEGFP—N1—Oct4-EGFP终止质粒,pEGFP—N1质粒为阴性对照,脂质体法转染小鼠N1H3T3细胞,阳性克隆经RT—PCR,荧光显微镜验证正确后,移入去核的猪卵母细胞,观察并记录发育率。结果未转染的NIH3T3阴性对照组、转染Oct4-EGFP的小鼠NIH3T3细胞和转染pEGFP—N1组均能够支持猪异种核移植胚胎的早期发育,但转染pEGFP—N1-Oct4-EGFP实验组重构胚的卵裂率和8细胞发育率与转染pEGFP—N1组和未转染的NIH3T3组的重构胚发育率差异不显著。结论NIH3T3细胞能够支持鼠-猪异种核移植胚胎早期发育,Oct4对鼠猪异种核移植胚胎的发育并没有表现出促进作用,可能也受到NIH3T3来源的异种核移植胚胎本身发育率低以及本实验室核移植显微操作水平的限制,具体的机制尚需进一步探讨。

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中国实验动物学报

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