作者：伍志强; 韩为东; 赵亚力; 司艺玲; 母义明...lrp16基因打靶es细胞
摘要：目的既往研究表明LRP16基因是一个雌激素反应基因，其表达水平与乳腺癌细胞增殖及侵袭密切相关。为对该基因进行生理功能研究，本文构建了针对小鼠LRP16基因的打靶载体，转染胚胎干细胞（embryonic stemcell，EScells）并筛选同源重组克隆。方法PCR方法筛选129品系小鼠基因组文库中LRP16克隆，在第5外显子内插入SA-RIES-βgeo序列，构建插入失活型打靶载体并转染Es细胞，经G418筛选，挑取抗性克隆，Southern blot方法鉴定同源重组ES细胞克隆。结果将包含第5至11外显子的LRP16基因组片段亚克隆到pBluescript SK Ⅱ＋载体，SA-IRES-βgeo序列的正确插入第五外显子中，打靶载体成功转染ES细胞，Southem blot结果显示具有一个打靶序列同源重组型插入的ES细胞克隆。结论成功构建了第五外显子插入失活型LRP16基因打靶载体并筛选到同源重组型ES细胞，为下一步建立LRP16缺失型小鼠并为从整体水平研究LRP16基因的生理功能奠定基础。
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