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兔肾体外灌注细胞脱落规律及其形态学改变

作者:王贵波; 王晓芹; 吴军灌注肾脏离体肾正常dmem体外tunel细胞核细胞密度凋亡细胞

摘要:目的观察室温下2l~25℃DMEM、血浆和血液+DMEM有氧灌注对离体兔肾的形态学影响,探讨离体肾在体外灌注情况下的细胞脱落规律.方法50只大耳白兔随机分为正常对照(5只)、DMEM组(15只)、血浆组(15只)、血液+DMEM组(15只),实验组观察时相点为灌注后1、3、6 h.各组离体肾分别用相应的灌注液进行有氧灌注,通过大体观察、含水率、病理切片、脱落细胞记数、原位标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase TdT-mediated biotin dUTP nick end-labeling,TUNEL)凋亡染色进行灌注肾脏的细胞脱落规律分析.结果各组灌注后肾脏外观明显水肿,正常肾脏含水率为78.6%,灌注后肾脏含水率显著升高,DMEM组肾脏灌注6 h后含水率为84.8%.光镜下见肾脏间质水肿、肾小球肾小管上皮细胞脱落、细胞核崩解、细胞密度减小.TUNEL染色正常对照凋亡细胞率为2.3%,DMEM组灌注1 h细胞凋亡率即达15.9%.灌注液中脱落细胞数随灌注时间进行性增加.结论室温下离体肾脏有氧灌注后有较严重的肾脏上皮细胞脱落现象,凋亡和坏死均参与了其发生机制.

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中国实验动物学报

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