作者：范薇; 杨敬; 隋丽华; 战大伟; 贺争鸣; 孙...钩端螺旋体外膜蛋白克隆基因转化重组
摘要：目的 构建L32-pGEX-5x-2重组质粒．诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32。方法 PCR获取编码LipL32的基因片段，构建重组克隆载体和表达载体，转化受体菌，诱导表达重组LipL32蛋白。将重组LipL32蛋白和钩体抗血清进行Westem-blot。结果 扩增出约750bp的LipL32成熟蛋白基因，LipL32基因插入pGEX-5x-2表达载体，表达产物谷胱甘肽S-转移酶(GST，26×10^3)与LipL32蛋白的融合蛋白的相对分子质量约为53×10^3，与预期大小一致。Westem-blot显示重组LipL32蛋白能与钩体抗血清特异结合。结论 LipL32蛋白能在大肠埃希菌中表达，重组LipL32蛋白具有免疫反应性。
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