作者：贾鹏禹; 孙蕊; 李良玉; 韩毅强; 周行; 冯...超快速液相色谱法腺苷酸肝细胞大鼠
摘要：目的建立大鼠肝细胞中3种腺苷酸[三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)]的超快速液相色谱测定法。方法制备3种腺苷酸混合标准工作液,同时将BRL大鼠肝细胞样品经超声波破碎仪处理提取目标化合物。液相色谱条件:色谱柱为Poroshell 120 SB-AQ C18(100 mm×3.0 mm,2.7μm),流动相为20 mmol/L磷酸氢二钠+20 mmol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速为0.20 mL/min,柱箱温度为30℃,二极管阵列检测器光谱扫描范围为190~800 nm,定量波长为259 nm,进样量为5μL。同时对方法的线性范围、稳定性、重复性及准确性进行验证。结果色谱柱对标准品和待检样品的3种腺苷酸组分分离状况良好,样品目标峰位无杂峰干扰,色谱分离在15 min内完成。各目标组分在10~100μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测限在0.652~0.793μg/mL之间;样品提取液于不同时间点进样所得ATP、ADP和AMP的峰面积RSD分别为2.06%、1.15%和1.26%;6份平行样品在同一检测流程下所得的ATP、ADP和AMP峰面积的RSD分别为2.13%、2.04%和1.89%;样品各组分平均回收率在97.05%~102.58%之间,RSD在2.16%~2.55%之间。结论建立了大鼠肝细胞中3种腺苷酸含量的超快速液相色谱测定法,且具有良好的线性、稳定性、重复性及准确性。
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