作者：唐磊 杨致邦 聂佳莹 黄进幽门螺杆菌酸适应crdr蛋白原核细胞基因表达
摘要：目的 原核表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）CrdR蛋白（即HP1365）,以探讨其在酸适应中的调控机制。方法 从H.pylori26695标准株基因组DNA中PCR扩增hp1365基因,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,转化E.coliJM109,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果 重组表达质粒pGEX-hp1365经双酶切、PCR和测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为25000,主要以包涵体形式表达,可与鼠抗His标签单克隆抗体特异性结合。结论 原核表达了H.pyloriCrdR蛋白,为进一步探讨其对酸信号的感应机制及其通过阻断酸信号的感应抗H.pylori感染的途径奠定物质基础。
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