作者:干惠珠; 张桂珍; 张凤春; 卜丽莎; 杨绍娟...shrna表达载体mdr1基因人红白血病细胞多药耐药
摘要:目的探讨靶向mdr1基因的shRNA表达载体对耐阿霉素的人红白血病细胞(K562/ADM)P-gp表达的抑制作用。方法合成靶向mdr1基因的短发夹shRNA表达载体,转染K562/ADM细胞。利用RT-PCR检测转染细胞中mdr1基因mRNA,Western blot、免疫细胞化学和流式细胞术分别检测P-gp的表达。结果在瞬时转染pSilencer^TM 3.1-H1 neo mdr1-A和mdr1-B shRNA表达载体的K562/ADM细胞中,mdr1基因mRNA转录分别减少到39.1%(P〈0.05)和30.8%(P〈0.01)。Western blot、免疫细胞化学和流式细胞术检测显示P-gp表达被明显而特异地抑制。结论靶向mdr1基因的shRNA表达载体能够特异而有效地抑制耐药的人红白血病细胞中的P-gp表达。
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