作者：赵宝全; 章金刚; 董朝辉; 贾莉玮; 沈永才...人蛋白c转基因小鼠乳腺生物反应器乳清酸蛋白
摘要：目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物.方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC.将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4.6kb的片段(WAP-hPC-PolyA).通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只.结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southern blot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELJSA检测,结果均有表达.结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
