作者:张少恩; 孙晗笑; 张光; 杨清玲; 沙文琼; ...大肠杆菌表达复性十二烷基磺酸钠淋巴细胞包涵体蛋白层析纯化亲和层析实验检测单核细胞高级结构活性蛋白缓冲液分子筛sds柱层析再利用趋化抑制重组
摘要:目的纯化、复性大肠杆菌表达的vMIP-Ⅱ包涵体蛋白.方法用8 mol/L尿素缓冲液变性溶解vMIP-Ⅱ包涵体,然后加入十二烷基磺酸钠(SDS)进一步促溶,利用金属亲和层析和分子筛层析纯化,再利用柱层析去除SDS,纯化后透析复性;通过荧光和单核淋巴细胞趋化抑制实验检测复性蛋白的结构和抑制单核淋巴细胞趋化的活性.结果重组vMIP-Ⅱ纯化和复性后,仍具有完整的高级结构和抑制单核细胞趋化的活性.结论已获得了重组vMIP-Ⅱ活性蛋白,为进一步研究应用奠定基础.
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