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rhIFN-β1a cDNA在CHO细胞上的表达

作者:李武平; 衣作安; 张成海; 王刚; 郑丽舒; ...干扰素中华仓鼠卵巢细胞表达脂质体技术

摘要:目的 在CHO细胞上表达rhIFN-β1a cDNA。方法 利用脂质体技术,将含hIFN-β基因的pRC/CMV-IFNβ-DNA载体和pSV2dhfr-DNA质粒按3:1的比例转染CHO-k 1dhfr-细胞,后者是选择性标记。筛选在缺乏胸腺嘧啶的选择培养基生长的单个细胞克隆,通过MTX加压扩增与dhfr基因共转染IFNβ基因。筛选的细胞株通过大规模培养,收集培养液经一系列的步骤纯化。结果 能够耐受0.6μmol/LMTX的细胞可产生IFN 10^5 unit per day/10^6 cells,CHO细胞中表达的rhIFN-β纯化后的抗病毒比活性可达2.2×10^8 IU/mg。结论 建立了适合表达人干扰素-β的CHO细胞株。

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中国生物制品学

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