作者:单连慧; 时成波; 孔双泉; 田晓乐; 杨亦代...重叠pcr稀有密码子hbsagcho细胞表达基因
摘要:目的:通过替换S基因稀有密码子,提高HBsAg在CHO细胞中的表达量。方法:利用重叠PCR技术,将S基因上3个稀有密码子替换成哺乳动物细胞偏爱的密码子,得到S^m基因。把S和S^m基因分别克隆到pCI载体上,并转染CHO(dhfr-)细胞,利用ELISA方法检测HBsAg的表达量。结果:获得预期的S^m基因。在CHO细胞中,S^m基因表达量明显高于S基因。结论:替换S基因稀有密码子可以提高HBsAg的表达量。
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