作者：贾丽丽; 俞永新; 黄莺; 王志伟; 岳广智; ...流行性乙型脑炎减毒活疫苗表型基因稳定性毒种e区核苷酸
摘要：目的 对乙脑减毒活疫苗SAl4-14-2株生产毒种及其疫苗病毒滴度、脑内毒力和E区核苷酸序列进行回顾性测定。方法 应用乳金黄地鼠肾传代细胞(BHK-21)结晶紫蚀斑法进行病毒滴度的测定，小鼠脑内法检测疫苗脑内毒力。应用RT-PCR方法扩增SAM-14-2生产毒种和疫苗E区的核苷酸，经凝胶层析纯化的PCR产物直接用于测序或克隆到pGEM-T载体中，经酶切和PCR鉴定后进行测序。结果疫苗在-20℃保存长达10多年，疫苗病毒滴度下降不超过0．5k；脑内毒力未见毒力回升。病毒蚀斑形态仍保持较SAl4野毒株形态小的特性；以不同批次疫苗和生产毒种提取的病毒RNA作为模板进行RT-PCR扩增，扩增的基因片段与预期大小一致；E区基因序列与野毒株差异的8个氨基酸没有一个发生回复突变。结论SAl4-14-2生产毒种及其不同年度不同批次疫苗的生物表型和E区核苷酸的特性是十分稳定的。
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