PC12细胞的PSI诱导性包含体富集了真核细胞翻译因子

作者：李兴安; 张应玖; 胡轶虹; 常明; 刘韬; 王...蛋白酶体抑制psi诱导性包含体真核细胞翻译因子

摘要：路易小体（Lewybody，LB），位于神经细胞核周（perikaryon）的嗜酸性包含体（eosinophilic inclusion），含有广泛的蛋白质组分，其中一部分是组成型蛋白质（consistent organization），另外一部分则是选择型蛋白质（selective composition）．为了在体外获得LB中未知蛋白质的新线索，通过人工合成蛋白酶体抑制剂PSI（proteasomal inhibitor，10μmol／L）作用PC12细胞48h，使其产生嗜酸性（stainingforeosin）和抗a．synuclein阳性（immunostaining for a-synuclein）的PSI诱导性包含体（PSI-induced inclusion），通过成功的分级分离（fractionation）纯化了完整、纯净的包含体，通过有效的双向电泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）分离了包含体蛋白质，通过无偏差的基质辅助激光解析．离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption／ionization time-of-flight massspectrometry，MALDI．TOFMS）鉴定了真核细胞翻译起始因子．3亚单位5（eukaryotic translation initiation factor 3 subunit5，elF-3ε）、真核细胞延伸因子-2（eukaryotic elongation factor2，eEF-2）和线粒体延伸因子-Tu（mitochondrial elongation factor Tu，EF-Tumt）等真核细胞翻译因子（eukaryotic translation factors）．这一结果提示，当蛋白酶体受到抑制时真核细胞翻译因子被富集到PSI诱导性包含体中，并且可能影响其形成过程．

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