作者：陈惠; 王红宁; 杨婉身; 赵海霞; 吴琦; 单...植酸酶phya基因定点突变毕赤酵母热稳定性
摘要：对重组酵母PP-NP^m-8的植酸酶phyA^m基因进行PCR介导的定点突变，即将植酸酶43位的苯丙氨酸替换为酪氨酸（F43Y），将其354、358位的异亮氨酸、亮氨酸分别替换为甲硫氨酸和苯丙氨酸（I354M，L358F），得到了2个突变体PP-NP^m-1（F43Y）及PP-NP^m-2（I354M，L358F）。含突变基因的重组表达载体pPIC9k-phyA^m-1，pPIC9k-phyA^m-2在毕赤酵母GS115中表达，对表达产物进行酶活性测定及热稳定性检测。结果表明：突变体PP-NP^m-1最适反应温度比未突变体PP-NP^m-8上升了3℃，75℃处理10min，热稳定性提高15％，比活力提高11％；PP-NP^m-2最适反应温度未改变，热稳定性比PP-NP^m-8仅提高3％，比活力降低6．5％。对突变前后的植酸酶空间结构进行比较预测，发现突变氨基酸Tyr43与空间位置相邻的Asn416之间形成氢键，增强了酶的热稳定性。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
《中国生物化学与分子生物学报》（CN：11-3870/Q）是一本有较高学术价值的大型月刊，自创刊以来，选题新奇而不失报道广度，服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《中国生物化学与分子生物学报》国内外公开发行，刊载以中文或英文撰稿的生物化学与分子生物学领域具有创新性的基础及应用基础原创性研究论文和反映当前国内外生物科学前沿或热门领域的综述性文章．本刊所设栏目有小综述、研究论文、研究简报、技术与方法、信息交流等。
杂志详情
