作者：毛建平; 王全会; 施水兰; 袁国刚; 左刚; ...mrna反义寡核苷酸靶点parassgfp
摘要：基因mRNA的靶点筛选是设计反义寡核苷酸的关键.建立了PARASS(poly-A anchored RNAaccessible sites screening)方法,即通过在mRNA末端引入poly A,与生物素标记的polyT退火结合,将其同链亲和素磁珠混合,使mRNA通过3'末端得到固定,保持mRNA的自然伸展和折叠,与寡核苷酸文库杂交筛选mRNA的结合靶点.PARASS筛选获得了绿色荧光蛋白(GFP)mRNA的3个反义寡核苷酸结合靶点,据其设计了多条反义寡核苷酸,与对照组相比,体外RNase H分析显示3个靶点均为有效,在HeLa细胞内针对靶点的反义寡核苷酸能抑制GFP的表达,得到了Northern印迹结果支持.PARASS对反义寡核苷酸药物设计具有应用价值.
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