作者：曹翠平; 吴小锋人血管内皮细胞生长因子基因表达重组杆状病毒家蚕
摘要：家蚕作为"生物工厂"生产重组蛋白质具有很多优势.构建携带编码人血管内皮细胞生长因子(VEGF)165个氨基酸的cDNA的重组杆状病毒.将此重组病毒接种5龄家蚕幼虫进行重组蛋白的表达生产.时相表达分析表明,感染后大约80 h时表达水平达到最高,而且重组蛋白主要存在于血淋巴中.从感染的幼虫收集血淋巴并用Nickle亲和层析纯化重组蛋白产物.定量分析表明,每条家蚕幼虫的表达水平高达426μg左右.通过细胞培养体外分析,发现与对照相比,加入纯化的重组VEGF(10 ng/ml和100ng/ml)能够使人HUVEC细胞体外培养细胞数增加1.8～3.3倍,说明家蚕幼虫表达的重组VEGF具有完全的生物活性,能够诱导内皮细胞在体外分裂增殖.
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