东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定

作者：杨锐; 彭方; 刘辉; 曹志贱; 李文鑫; 毛歆...胶质瘤细胞氯离子通道表达人脑膜片钳gst抑制作用东亚钳蝎毒腺功能鉴定

摘要：从中国东亚钳蝎Buthus martensii Karsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽(命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列.该毒素多肽与已报道的氯毒素(chlorotoxin)高度同源,其蛋白质一级序列有68%的同源性.为了鉴定BmKCT的生物学功能,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白(rBmKCT).通过膜片钳实验,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞(gliomas cell)表面的氯离子通道电流的作用.结果显示,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的.实验证明,在细胞水平上,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂.

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