短裙竹荪（Dityophora duplicata）凝集素纯化与生化性质

作者：林玉满; 苏爱华凝集素短裙竹荪分离纯化性质

摘要：短裙竹荪子实体经生理盐水抽提、硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose和Sephadex G-100柱层析纯化得到短裙竹荪凝集素(Dityophora duplicata(Bosc)Fischer lectin),简称DDFL.DDFL经PAGE显示单一条带,SDS-PAGE测得其亚基分子量为22.3 kD,Sephadex G-100凝胶过滤测得分子量为45.3 kD,DDFL不合中性糖,IEF测得其等电点为3.92.该凝集素对供试的4种血型人血和兔、小牛、鸭、鸡、鲫鱼以及青蛙血红细胞具有凝集作用,但不凝集鳖红细胞.它还可以凝集小鼠脾脏淋巴细胞和小鼠S180肉瘤细胞,对兔红细胞的凝集作用可被乳糖、棉子糖、半乳糖、α-甲基半乳糖、β-甲基半乳糖和N-乙酰半乳糖胺所抑制.氨基酸组成分析表明,DDFL舍有17种氨基酸,其中天冬氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸含量较高.经测定,其N末端为甘氨酸.DDFL对热、酸和碱具有一定的稳定性,经60℃处理10 min,可保持较高的活性,在pH 4.0～9.0范围内较稳定,其凝血活性依赖于Mg2+和Cg2+二价阳离子,Mn2+和Zn2+则无影响.DDFL对小鼠腹腔注射的半致死量为70.63 mg/kg.

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