作者：吴毓; 赵宝昌; 王继红; 任风; 吴妍宁; 赵...核糖核酸酶抑制因子缺失突变毕赤酵母
摘要：人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kD的酸性蛋白质，富含亮氨酸和半胱氨酸．作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来胰RNase侵袭．HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成，7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N端、C端在空间上较为接近．用PCR方法在HRI cDNA 5′端去除30个核苷酸，并将此缺失突变的HRI的cDN段构建于质粒pPIC9K，电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中，进行分泌型表达．对表达产物进行亲和层析纯化．实验结果表明，N端缺失突变的HRI与RNase A的亲合力较野生型HRI降低1倍，但依然具有竞争性抑制RNase A的活性，表明HRIN端10个氨基酸残基缺失后并未丧失其抑制活性．
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