作者：赵敏; 宋小双; 杨谦; 刘桂丰; 王玉成血红密孔菌漆酶基因克隆序列分析
摘要：为克隆血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)漆酶基因，根据真菌漆酶氨基酸序列保守区设计了1对简并引物．以血红密孔菌基因组DNA为模板，PCR扩增出长1227bp的漆酶基因片段，以此序列为基础，通过5′及3′RACE技术克隆出漆酶全长cDNA序列，序列长为1902bp，其5′端和3′端非编码区长分别为51bp和297bp，开放阅读框长1554bp，编码518个氨基酸的蛋白．该蛋白具有4个铜离子结合区域，预测其相对分子量为56313．2，等电点为5．59，其氨基酸序列与Pycnoportts cinnabarinus漆酶(lcc3-2)的同源性最高，为96％．以该cDNA编码区的两端序列为引物，PCR扩增得到漆酶的长度为2154bp的全长DNA序列，序列中包括10个内含子序列，长为52-70bp．
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