HeLa细胞中Skp2的表达调控p21^WAF／CIP1稳定性

作者：钱俊杰; 孙国敬; 孟祥兵; 宋宜; 梅柱中; ...skp2

摘要：泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132处理的HeLa和SaoS-2细胞中，低表达的p21^WAF/CIP1受泛素-蛋白酶体通路调控，为探讨肿瘤细胞中高表达的E3连接酶底物结合亚基-Skp2和低表达的p21^WAF/CIP1之间的关系，在HeLa细胞中转染Skp2的反义寡核苷酸后，p21表达水平明显升高．同时，相对于转染空载体和Skp2△F(Skp2的F-box缺失突变体)的真核表达载体，转染全长Skp2的HeLa细胞中，p21表达水平显著下降，说明肿瘤细胞中Skp2调节p21的稳定性，并且这种调控作用依赖于Skp2蛋白中的F—box结构．免疫荧光结果表明，Skp2和p21共定位于细胞核，这为两者间的相互作用提供了前提；体内相互免疫共沉淀结果表明，p21和其它SCF^Skp2的底物一样与Skp2直接结合，并且它们之间的结合区不在F-box结构域，这一结果在体外的GST-pull down实验中得到验证、

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