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用suc2信号肽捕获系统筛选小鼠胚胎cDNA文库基因

作者:孙强; 黄红艳; 周鹏; 冯蕾; 秦红; 韩骅cdna文库筛选非编码rna蛋白质分泌

摘要:PCR扩增11d小鼠胚胎cDNA文库插入片段,将0.5~2、0kb的扩增产物插入筛选栽体的多克隆位点,转化suc2基因缺陷酵母宿主菌.然后将约10’个酵母菌落接种于选择性平板上进行筛选,得到了182个可在选择性培养基上生长的菌落.PCR扩增显示,插入片段大小分布于0.1~1.5kb之间.对其中14个阳性菌落的重组子进行序列测定,分别代表6种不同的基因序列,与报告基因都有正确的读框内融合.其中两种基因序列反复被筛到,分别命名为spt1、spt2.spt1[gi:27728766],可能以非编码RNA的身份参与蛋白质向细胞外分泌的过程,而spt2编码多个连续的赖氨酸,可能通过非经典途径介导蛋白质的分泌.

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中国生物化学与分子生物学报

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