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CaMBP-10的cDNA克隆和表达及钙调素结合活性分析

作者:祁倩; 饶恩于; 王喆; 刘华; 凌启阆; 李翠...结合活性

摘要:采用RT-PCR法,从中国大白菜中分离了编码CaMBP-10的cDNA克隆.该cDNA全长496bp,编码92个氨基酸,3′端含有216bp的非编码区和poly.A尾.将此BP-10cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET15b并转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)condonplus-RIL进行表达.以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP-10进行鉴定,证明其保持了与天然BP-10相同的钙调素结合活性.氨基酸和核苷酸序列分析结果显示,它与植物转脂蛋白高度同源,特别是含有8个保守半胱氨酸.BP-10与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等.据此认为,CaMBP-10是转脂蛋白家族的新成员,Ca^2+/CaM信号系统可能参与植物转脂蛋白功能的调节.

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中国生物化学与分子生物学报

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