人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达

作者：陈培拉; 季永镛; 常智杰; 张淑平; 孙兵; ...人源cdc50基因分子克隆表达协同抑制因子糖皮质激素受体大肠杆菌

摘要：糖皮质激素受体(GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用．这一过程往往受到转录协同调节因子的控制，包括协同抑制因子或协同激活因子的作用．克隆了人源双跨膜受体分子，并命名为hCDC50．该分子编码区有1056bp，与鼠源基因mCDC50在核苷酸水平有90％一致性．将hCDC50蛋白的164～317编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗．用二维双向扩散检测抗体为阳性，抗原的滴度为125μg／mL体外翻译研究显示该基因编码蛋白约为40kD，与Western检测在动物细胞中的表达一致．用hCDC50真核表达质粒与GR萤光报告系统共转染COS-7细胞显示，hCDC50对GR信号转导有明显的抑制作用，其对GR信号通路的抑制作用达3～4倍以上．hCDC50可能为一个新的协同抑制因子，在抑制GR的转录激活过程中起作用．

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