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四引物PCR扩增反应的单管SNP快速测定法

作者:卜莹; 古卓良; 张晓丹; 周国华单核苷酸多型性人类基因组核苷酸序列聚合酶链反应

摘要:建立一种在单管中进行单核苷酸多型性(SNP)快速测定的高效廉价方法.以人ABCA1基因中的1823M为研究对象,设计4种引物进行PCR扩增,其中两种引物用于扩增一段含有SNP位点的DN段,另两种引物为SNP位点特异性引物,4种引物在单管中同时进行PCR扩增反应,根据延伸产物的长度确定SNP的类型.为提高SNP测定的特异性,在特异性引物的3’端倒数第3个碱基引入了一个人为错配碱基,使引物的错误延伸率显著降低,大大提高了SNP分析的准确性.实验结果表明,所建立的方法简单,操作简便,可在单管中完成SNP的测定反应.

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中国生物化学与分子生物学报

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