作者：何官榕; 何碧珠; 吴沙沙; 石京山; 陈集双...多叶斑叶兰资源保存植株再生器官发育转录组分析
摘要：多叶斑叶兰,是兰科斑叶兰属濒危野生植物、国家二级保护植物,具有极高的观赏和药用价值。多叶斑叶兰由于分布种群小,传播扩散能力弱,自然繁殖受到极大限制。以野生多叶斑叶兰茎段作为外植体,建立高效直接的植株再生体系。结合高通量转录组测序技术与生物信息学分析技术,深入挖掘参与多叶斑叶兰器官发育过程的功能基因。结果表明,Morel+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LKT+1.0mg/LNAA+1g/L蛋白胨+25g/L蔗糖+7.0g/LAgar+1.0g/L活性炭+30g/L香蕉+50g/L土豆为最佳的芽诱导培养基;Morel+3mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT+0.01mg/LTDZ+2g/L蛋白胨+25g/L蔗糖+7.0g/LAgar+1.0g/L活性炭30g/L香蕉+50g/L土豆为最佳芽增殖培养基;1/2Morel+1.0mg/LIBA+0.1mg/LNAA+1g/L+花宝2号+25g/L蔗糖+7.0g/LAgar+1.0g/L活性炭+1g·L-1蛋白胨为最佳的生根培养基。转录组测序分析组装获得170688个Unigene,平均长度为584bp,N50为833bp。17352个Unigene比对注释到NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库。野生苗与组培苗差异表达UnigeneGO与KEGG功能富集分析显示,Unigene主要参与调控植物激素信号转导、植物形态发育、次生代谢过程以及能量代谢过程等生物学功能。进一步分析获得511个参与植物器官发育调控相关的转录因子。成功建立了多叶斑叶兰种质资源保存与高效离体再生体系,结合高通量转录组学技术,获得全面完整的多叶斑叶兰转录组信息特征,为后期多叶斑叶兰快速扩繁、遗传转化以及功能基因鉴定、遗传发育及其调控机制研究奠定基础。
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