作者：张心愿; 邓佳; 刘馨; 陈琳; 林峻; 蔡伟文bstdna聚合酶大片段多重置换扩增石蜡包埋组织全基因组扩增
摘要：Bst DNA聚合酶大片段作为一种常用的DNA聚合酶,因其独特的特点：能引发链置换反应、高保真、耐高温等,而成为一种重要的DNA多重置换扩增酶。目的：为减少成本,设计一种高产,方便且扩增活性高的Bst DNA聚合酶大片段表达体系;探究该酶应用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA的扩增条件。方法：采用p TWIN1质粒作为载体克隆表达Bst DNA聚合酶大片段,应用几丁质亲和层析柱纯化该酶,使用该酶对人类基因组DNA进行不同温度下扩增,探究其最适反应温度,并据此对胃癌石蜡包埋组织基因组DNA进行扩增。结果：由此得到的Bst DNA聚合酶大片段能运用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA的扩增,扩增效率可达200倍,并能应用于a CGH芯片。结论：扩增得到保真性高,覆盖基因组范围大的DNA扩增产物。该应用与a CGH结合,使得对少量的癌症石蜡包埋组织DNA样本进行全基因组扩增,并进行其基因拷贝数变异研究成为可能。
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