作者:刘筱娣; 杜宁; 郭丽宏变形链球菌密度感应系统come基因框内缺失突变
摘要:变形链球菌的种内密度感应系统由corn基因家族编码控制。膜受体ComD接受密度感应信号后激活茵体内的反应调节子ComE,ComE作为启动子可以调节一系列相关基因的表达。应用框内缺失突变法(in-frame deletion),通过两次同源性重组,成功构建了变形链球茵comE基因突变株IFD140△comE。由于框内缺失突变没有引入任何的遗传标记物,所以有效地避免了传统的基因失活方法——插入重复(insertion duplication)和等位交换(allelic exchange),所导致的下游基因极性效应(polar effect)。经过PCR、测序分析及RT-PCR,证实IFD140△comE仅在comE基因内部缺失了717bp的片段,未引入任何外源性DNA,且comE下游的comD基因可以正常转录,无极性效应产生。对IFD140△com表型特征的研究发现,在液体培养基中IFD140△com更易发生沉淀性生长和贴壁性生长。菌体呈长链状排列。IFD140△comE的成功构建,为进一步研究变形链球菌种内密度感应系统奠定基础。
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