作者：冯军科; 薛飞; 李娇; 祖立闯; 朱远茂; 任...牛呼吸道合胞体病毒g基因克隆表达
摘要：将牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus，BRSV）G基因截短成2个片段G1和G2，然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板，利用PCR分别扩增G1和G2基因片段，其大小分别为570bp和308bp。将目的片段定向克隆到pET30a表达载体，酶切及测序鉴定均正确后，转化B121表达菌，经IPTG诱导后G1和G2基因片段均获得了表达，且为可溶性表达。利用Ni柱亲和层析法在非变性条件下纯化重组蛋白，经免疫印迹试验鉴定证明纯化的重组蛋白G1具有良好的抗原性和特异性，而重组蛋白G2无反应性。应用纯化的重组蛋白G1进行的间接ELISA与免疫印迹试验在国内牛血清中检测到了BRSV血清抗体。对建立BRSVG蛋白的血清学诊断方法和为开展BRSVG蛋白生物学功能的研究奠定了基础。
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