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首页 期刊 中国生物工程 珍稀濒危树种毛红椿微卫星DNA分离及SSR反应体系优化【正文】

珍稀濒危树种毛红椿微卫星DNA分离及SSR反应体系优化

作者:刘军; 孙宗修; 陈益泰; 何贵平; 吴天林毛红椿微卫星链亲和素磁珠ssr反应体系

摘要:以江西宜丰种源毛红椿为材料,成功提取其基因组DNA。利用改良的链亲和素磁珠法亲和捕捉出毛红椿基因组微卫星DN段,并构建了富含微卫星的基因组文库。从构建的基因组文库中随机挑选了63个单克隆进行测序,其中50个单克隆成功测序,含有微卫星的单克隆有18个,并根据测序结果设计并合成SSR引物18对。利用所合成的引物优化SSR反应体系,对影响SSR反应的各个因子进行了探讨。确定了模板DNA最适浓度为30ng;dNTP的最适浓度为0.3mmol/L;0.3μmol/L是引物在反应体系中的最合适浓度。建立了重复性好、稳定性好的SSR反应体系,为下一步进行毛红椿群体遗传结构和遗传变异研究提供了技术支持。

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