作者：董加喜; 李运南; 陈郧东; 马涧泉bax基因鼻咽癌细胞差异显示技术
摘要：目的：应用差异显示技术，筛选鼻咽癌相关基因的异常表达。方法：选用连接有bax基因的真核表达质粒pSFFV，bax．neo，采用脂质体转染法，将其转染到CNE：细胞中，以转染有空载的pSFFV—neo质粒的CNE，细胞为对照，采用Trizol试剂快速抽取法，提取mRNA经逆转录成cDNA，用锚式引物和随机引物进行PCR扩增，加入同位素，用6％的测序变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳PCR产物进行分离。切下聚丙烯酰胺凝胶上明显的6条差异带，回收差异cDNA，进行第二次PCR扩增，经低溶点琼脂凝胶回收，获取大量PCR扩增的差异cDN段，同位素标记作为探针，抽取RNA，进行点样，杂交，洗膜放射自显影等步骤，进行细胞RNA的Northern印迹斑点杂交。结果：表明4条cDN段均为CNE2细胞表达片段。结论：发现bax可诱导CNE2细胞中有某些相关基因表达，并抑制了CNE2细胞某些相关基因表达。
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