作者:杨煜; 劳凤学; 高振平; 徐桂月; 张鹏宇; ...fs315gst融合蛋白抗体抗体制备蛋白表达重组人免疫组化染色western原核表达载体
摘要:构建FS315C末端肽原核表达载体pGEX-FS315C,表达重组人卵泡抑素315(FS315)C末端肽,制备抗FS315C末端抗体.实验结果显示,重组pGEX-FS315C表达质粒在E.coli BL21中高表达GST-FS315C融合蛋白,采用亲和层析与电泳纯化GST-FS315C免疫家兔,获得抗FS315C末端抗体,Westerr blot检测显示该抗体只与FS315结合,而与FS288无交叉反应.ELISA检测显示抗FS315C末端抗体与FS315特异结合,而与FS288、inhibin及activin A等蛋白均无交叉反应.利用该抗体进行的免疫组化染色显示巨噬细胞FS表达阳性,与以往报道一致.实验采用重组GST-FS315C免疫家兔,成功地制备了抗FS315C末端特异抗体.
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