作者：胥全彬; 任冽; 张艳红; 黄维; 靳彦文; 李...疟疾核酸疫苗生产工艺胸腺嘧啶合成酶基因高密度发酵质粒纯化
摘要：疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向.在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核酸疫苗pThyAAWTE.对影响工程力高密度发酵的几个因素进行了分析,所优化程序可使工程菌发酵密度达OD600 60以上;此外,还对质粒初步纯化过程中的几个重要参数进行了分析,初步结果表明,悬浮液体积(ml):菌体湿重(g)在2:1以上,对质粒的得率没有明显影响;碱裂解时间在一定范围内不影响质粒的质量;合适的悬浮液体积/裂解液/中和液比能明显提高质粒产量;用优化程序所提取的质粒其产量与试剂盒提取的量相当.为pThyAAWTE的大规模纯化打下了基础.
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