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C型产气荚膜梭菌α、β1毒素基因的融合

作者:许崇波; 许崇利; 刘庆平; 朱永宁; 曾瑾; ...c型产气荚膜梭菌基因融合pcr仔猪红痢基因工程亚单位苗

摘要:利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体DNA中扩增出α和β1毒素基因,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建了含α-β1融合基因表达质粒重组菌株BL21(DE3)(pETXAB1).经酶切鉴定和核苷酸序列测定证实,构建的重组质粒pETXAB1含有α-β1融合基因,且基因序列和阅读框架均正确.经ELISA检测,重组菌株表达的α-β1融合蛋白能够被α、β1毒素抗体识别.免疫实验结果表明,α-β1融合蛋白免疫的小鼠可以抵抗1MLD的C型产气荚膜梭菌C59-44毒素攻击,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪红痢基因工程亚单位苗的候选菌株.

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