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基因重组大肠杆菌表达类人胶原蛋白诱导条件优化研究

作者:马晓轩; 范代娣; 骆艳娥; 米钰类人胶原蛋白大肠杆菌表达优化研究诱导条件基因重组重组大肠杆菌外源基因表达发酵生产细胞密度外源蛋白操作方式高密度酸浓度表达量中后期积累量补料生长

摘要:为了提高重组大肠杆菌BL 21高密度发酵生产类人胶原蛋白的产量,分别研究了诱导时机、乙酸浓度、诱导强度以及补氮方式对外源基因表达的影响,并对各因素进行了优化.采用补料-分批式发酵,初始装液体积为6L.最终细胞密度可达到84.3g/L,类人胶原蛋白的表达量为14.6g/L.结果表明:在对数生长的中后期进行诱导,尽量减少乙酸的积累量,42℃诱导3h后降温至39℃继续诱导,并采用每隔10min补36ml补料氮溶液的周期操作方式,有利于细胞的生长和外源蛋白的表达.

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