作者：赵学明; 朱士恩; 侯云鹏; 周光斌套式pcr检出率扩增片段卵裂球pgd遗传学诊断升高胚胎性别鉴定桑椹胚污染率
摘要：目的:测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度,为附植前遗传学诊断(PGD)、家畜胚胎性别鉴定等提供技术保障.方法:以桑椹胚卵裂球为模板进行扩增,建立昆明白小鼠特异的SRY/ZFX双重套式PCR性别鉴定体系.按卵裂球数量的不同分为五组,对应的卵裂球个数分别为1、2、3、4、5及以上.根据有效扩增结果得出双重套式PCR的灵敏度.结果:第1组(卵裂球个数为1),有效检出率为85%(34/40),污染率为7.5%(3/40),漏检率为7.5%(3/40).随着卵裂球个数的增多,有效检出率逐渐升高,而污染率和漏检率则呈逐渐下降趋势.第5组(卵裂球达到5及以上),有效检出率达到100%,漏检率为0.对于第2、3、4、5组而言,有效检出率及漏检率各组间并无显著差异(P＞0.05);而第一组与其它各组间,有效检出率及漏检率存在显著差异(P＜0.05).结论:双重套式PCR可以有效扩增基因组DNA量约为12pg的模板,且扩增片段为单拷贝片段.
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