作者：张怀; 袁其朋; 朱亚平; 马润宇融合表达载体et融合蛋白大肠杆菌包涵体总蛋白表达水平诱导表达密码子变性
摘要：为了在大肠杆菌中表达生产hepcidin,根据大肠杆菌密码子偏好性,化学合成了人hepcidin的基因序列,并构建了hepcidin的融合表达载体pET-hpc.pET-hpc在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其N端带有6个组氨酸.通过优化诱导表达条件,该融合蛋白表达水平显著提高,占总蛋白的25.2%.表达的包涵体经1%Triton X-100洗涤后溶于8mol/L尿素,在变性条件下采用金属螯合层析进行纯化,所得融合蛋白纯度大于95%.
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