作者：金世辉; 刘必成; 张春秀; 唐祖明; 陆祖宏琼脂糖玻片固定时间修饰载体封闭共聚焦激光扫描蛋白质微阵列条件优化糖浓度
摘要：目的:建立一种以琼脂糖修饰的玻片为载体的蛋白质微阵列制备的优化方法,比较琼脂糖修饰玻片和醛基修饰玻片及氨基修饰玻片对蛋白质固定效率的优劣.方法:将羊IgG固定在载体表面,经过洗涤、封闭,再加入Cy3标记的兔抗羊IgG,孵育,洗涤后用共聚焦激光扫描仪获取图像,检测各点的荧光强度,根据荧光强度确定最佳琼脂糖浓度,最佳NaIO4浓度,最佳固定时间以及封闭时间等实验条件.结果:琼脂糖浓度为1.2%、NaIO4浓度为20mmol/L、固定时间为1h、孵育时间为45min时,蛋白质在载体上的固定效率和反应活性最高.在固定的抗体浓度相同的情况下,琼脂糖修饰玻片荧光强度是醛基修饰玻片的2.6倍,是氨基修饰玻片的9倍.结论:确立了蛋白质微阵列生产用琼脂糖修饰玻片制备的优化条件,用该优化条件制备的琼脂糖玻片更适合用于蛋白质微阵列载体.
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