作者：吴晓萍; 李校堃; 苏志坚; 郑青; 吴思娴; ...fgf活性纯化表达肝素亲和层析mtt法副作用人碱性成纤维细胞生长因子突变体iptg
摘要：为了降低由人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的广谱促分裂活性引起的潜在副作用,用中性氨基酸丙氨酸取代了hbFGF第108位的丝氨酸,构建了促分裂活性降低的hbFGF突变体(mhbFGF).IPTG诱导突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.mhbFGF的表达量约为全菌体蛋白的30%.通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白.MTT法检测促分裂活性表明,mhbFGF的促分裂活性显著低于野生型hbFGF.纯化的mhbFGF可用于进一步的药效和安全性研究.
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