作者：曾志锋; 李月琴; 唐冬生; 张欣; 王莹; 郭...rnai技术rna干涉技术人巨细胞病毒ul49基因基因表达基因沉默治疗药物载体介导
摘要：为了研究RNA干涉抑制HCMV UL49基因的作用,以pLXSN(U6启动子)为模板通过两步PCR的方法扩增含U6启动子的siRNA表达片段,并通过TA克隆将siRNA表达片段克隆到pMD18-T载体构建成siRNA表达质粒,同时以人巨细胞病毒AD169病毒株基因组为模板PCR扩增UL49基因,将其克隆到pEGFP-N1构建融合质粒pEGFP-UL49.通过脂质体介导将siRNA表达质粒和pEGFP-UL49质粒共转染人宫颈癌细胞系HeLa,在荧光显微镜下观察RNA干涉结果.通过这种方法得到具有介导RNA干涉的siRN段,为UL49基因沉默研究提供技术基础.
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