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产生志贺样毒素的噬菌体φ297整合酶基因(int)的克隆和序列分析

作者:翟静; 张凤珍; 蒋汉明; 曹奇志噬菌体整合酶酶基因vt志贺样毒素亚克隆序列分析dna片断氨基酸序列末端

摘要:目的:克隆并分析细菌性噬菌体ψ297的整合酶基因(int).方法:采用加接头的基因DN断为模板进行步移PCR,根据溶源性噬菌体ψ297的染色体DNA上类似于噬菌体933W的整合酶基因的一个40个核苷酸设计引物,进行扩增、克隆、亚克隆、测序和序列分析.结果:得到了噬菌体ψ297编码的整合酶基因(int)的完整序列,它的长度是1287bp,编码了428个氨基酸的Int蛋白质.将它们的序列与λ噬菌体的整合酶家族其它成员进行了比较,发现噬菌体ψ297的整合酶基因(int)与噬菌体VT1-Sakai的整合酶基因有79%的同源性,噬菌体ψ297的Int蛋白与噬菌体VT1-Sakai的Int蛋白在氨基酸序列上有82%的同源性.N-末端的氨基酸区域是完全保守的,而中心区和C-末端则显示出较大差异.结论:噬菌体ψ297与λ噬菌体的int基因来源于同一基因库,噬菌体ψ297可能属于λ噬菌体家族.

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