作者:钱冬萌; 侯伟; 闫志勇; 赵百慧; 付强; 王...蜂毒素蛋白基因抗原性dh嵌合体纯化iptg剪接
摘要:在E.coli DH5α中表达26肽蜂毒素与基因变构人白细胞介素2的嵌合体蛋白,并进行初步纯化和抗原性检测.利用剪接式重叠延伸(spliced overlap extension,SOE)技术在26肽蜂毒素与基因变构IL-2的基因之间导入四个易形成空间结构的氨基酸残基组成的连接肽(GlY4Ser)3,构建嵌合体蛋白的基因,克隆到原核表达载体pGEX4T-2中,重组质粒转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达目的融合蛋白,纯化蛋白经Thrombin酶切后进行SDS-PAGE与Western-blot鉴定.结果表明重组蛋白有良好的抗原性.
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