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Magainin和cecA-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达

作者:张素芳; 贾赟; 蔡梅红; 仇妍虹; 陈溥言抗菌肽abp基因分泌表达毕赤酵母金黄色葡萄球菌

摘要:选用毕赤酵母偏爱密码子,设计合成了新型抗菌肽基因.所合成的magainin基因和cecA-mil杂合肽基因全长分别为101bp和60bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端.其中,cecA-mil杂合肽基因根据cecropinA N端第1~7个氨基酸残基、melittin N端第5~12个氨基酸残基所设计合成.基因分别克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-mag和pPICZα-A-CM.在AOX1(醇氧化酶)启动子调控下,类似天然抗菌肽大小的magainin及cecA-mil蛋白获得分泌表达,其表达量分别为105mg/L和118mg/L.初步抑菌活性测定,显示两者对金黄色葡萄球菌及E.coli DH5α有较好的抑杀活性.

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