作者:苏志坚; 吴晓萍; 郑青; 冯雅; 于平野; 曲...人工合成人内皮细胞生长抑制素毕赤酵母高密度发酵癌症
摘要:根据人胶原蛋白ⅩⅧ NC结构域C末端编码内皮细胞抑制生长素(Endostatin)的成熟多肽序列,人工合成了由毕赤酵母(Pichia pastoris)中偏爱密码子组成的内皮细胞抑制生长素基因序列.该基因以N端融合的方式正确插入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA中.通过电激将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168细胞中,筛选获得表达具有生物活性的内皮细胞生长抑制素的高产菌株.在摇瓶发酵水平上,产量达到80mg/L.而利用生物反应器进行高密度发酵,Endostatin的产量可达125mg/L.纯化后的Endostatin具有抑制小鼠血管内皮细胞增殖的活性.
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