作者：肖顺勇; 张鹏飞; 熊熙文; 王业启; 吴厚雄...转录激活因子克隆表达生物活性gst表达系统
摘要：AP-2γ基因是AP-2基因家族中非常重要的转录激活因子,它对脊椎动物的胚胎发育起着十分重要的作用,并与细胞的生长及癌变有一定的联系.将人的AP-2γ基因插入表达载体GST系统中的pGEX-4T-2的谷胱苷肽-S-转移酶基因下游,转化E.coli DH5α,鉴定挑选出阳性菌落并扩大培养,提取重组质粒进行DNA测序,确定其阅读框码的正确性.再将正确的重组质粒转化E.coli BL21,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,在Tac启动子作用下,表达出一条81kDa的蛋白质带,所得蛋白质用谷胱苷肽琼脂糖-4B纯化后,得到融合蛋白质,通过凝胶迁移率变动分析和免疫印迹分析实验,测得该蛋白质的部分生物活性,结果表明,它具有很好的生物学活性,为进一步对AP-2γ基因的功能进行研究打下了良好的基础.
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