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Bt CrylAc抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示

作者:刘凯于; 蒋才富; 洪华珠; 彭建新; 余泽华粉纹夜蛾细胞系抗性敏感mrna差异显示抗性基因离体细胞敏感细胞

摘要:为了研究昆虫对Bt的抗性机制,以苏云金芽孢杆菌CrylAc活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选80代,获得了高抗性细胞。采用DDRT-PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异,经反向RNA斑点印迹杂交确证了5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区,两种ESTs(GenBank注册号:S1,CF322415;S3,CF322417)与数据库中EST没有显著同源性,另一种S2(GenBank注册号:CF322416)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1(GenBank注册号:CF322413)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有60%~63%的同源性,从抗性细胞特有的R2(GenBank注册号:CF322414)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约30%的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。

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