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黑芸豆中新型凝集素的分离纯化及其功能活性

作者:蔡茜茜 洪永祥 汪少芸黑芸豆凝集素凝血抗真菌

摘要:目的:分离纯化一种黑芸豆凝集素,对其部分生物活性进行表征和研究。方法:采用缓冲液抽提、AFBlue HC-650M亲和色谱、CM Sephadex c-25阳离子交换色谱及Sephadex G-50凝胶过滤色谱进行分离纯化,通过SDS-PAGE分析鉴定,并对其凝血活性、抗真菌活性进行表征。结果:从黑芸豆中分离纯化出一种凝集素,命名为BKBL,经SDS-PAGE鉴定达到电泳纯。BKBL为单体蛋白,相对分子质量为36 ku,经PAS染色鉴定为糖蛋白,含糖量11.9%。其对人血和小鼠血均具有一定的凝集活性,对小鼠血的凝集活性高于人血。BKBL凝血活性在70℃以下,p H 2~10范围内高度稳定,在p H 11处理30 min后活性保留50%,在100℃处理30 min后活性完全丧失。抑菌试验表明,BKBL对黑曲霉、香蕉尖孢镰刀菌、锥栗炭疽病病菌、莲细极链格孢菌、瓜果腐霉病菌、葡萄灰霉菌具有抑制作用。结论:从黑芸豆分离纯化出的一种凝集素,对小鼠血有较高的凝集活性,性质稳定;对多种真菌有抑制作用。

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