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微量连苯三酚自氧化法测定SOD活性的条件优化

作者:王莹; 刘凤霞; 杨海朝; 薛刚; 黄亚平; 卞...连苯三酚自氧化法超氧化物歧化酶活性测定条件优化

摘要:针对目前微量连苯三酚自氧化法测定SOD活性条件不一、测定结果重复性差的问题,实验考查不同保温时间、缓冲液体系、终止剂、加酶量等因素对SOD活性检测结果的影响,确定了最佳的检测条件为:pH7.8的0.9%生理盐水(内含1mmol/L Na2EDTA)作为酶溶剂,以pH8.6的50mmol/L Tris-HCl(内含1mmol/L Na2EDTA)作为缓冲体系,加入酶液保温20min,立即加入10μL 0.057mmol/L连苯三酚,反应3分钟后加入20μL 50g/L维生素C终止剂终止连苯三酚自氧化反应,于325nm波长下测定酶活性。在该条件下可以稳定地重复测定SOD活性,该方法可为SOD产品的活性检测提供参考依据。

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